生物学论文_鉴别蓝舌病病毒血清29型RT-PCR与qR
文章摘要:为了建立快速鉴别蓝舌病病毒血清29型(BTV-29)的方法,根据BTV-29型毒株基因节段2 (Seg-2)的序列特征,分别设计了用于RT-PCR与qRT-PCR方法的特异性引物与TaqMan探针,通过试验确定其敏感性,用BTV-1~BTV-24等核酸作为对照评价其特异性。对BTV-29感染动物血液样本的中病毒核酸进行监测,并用BTV群特异qRT-PCR方法验证其可靠性。结果显示,建立的BTV-29特异RT-PCR的灵敏度是1.12×102 copies/μL,而BTV-29特异qRT-PCR的灵敏度是1.12×101 copies/μL,均与BTV-1~BTV-24、流行性出血病病毒(EHDV)、帕利亚姆病毒(PALV)和阿卡斑病毒(AKAV)之间无交叉反应;用BTV-29特异qRT-PCR检测BTV-29型感染山羊血液中的BTV-29核酸的动态监测结果与BTV群特性qRT-PCR检测结果基本一致。本研究建立的BTV-29特异RT-PCR和qRT-PCR方法均具有良好的特异性和较高的灵敏度,能快速鉴别BTV-29,为BTV-29的致病性、诊断与流行病学研究提供了技术保障。
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