四川动物

中医学论文_溃疡性结肠炎湿热证动物模型的建立

 

文章摘要:目的 建立并评价病证结合溃疡性结肠炎(UC)湿热证小鼠模型。方法 84只c57bl/6j雄性小鼠,随机分为正常组、疾病模型组、双因素造模组、多因素造模组,每组21只。正常组采用普通饲料喂养,自由饮水;疾病模型组采用3%葡聚糖硫酸钠溶液(DSS)自由饮用7天,普通饲料喂养;双因素造模组在疾病模型组基础上叠加14天高脂饲料喂养;多因素造模组在双因素造模组基础上叠加每日8 h的气候箱放置,共14天。在造模期间,每日观察小鼠的证候学评价指标(一般情况、体重、饮水量、腹泻评分),在DSS溶液饮用第3、5、7天观察各组小鼠疾病评价指标[疾病活动指数评分(DAI)、结肠长度、重量、脾重],并分别用酶联免疫法(ELISA)、酶联免疫组织化学染色法、HE染色方法观察炎症性指标[白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)、小鼠肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、血清钙卫蛋白(SC)、C反应蛋白(CRP)]、黏膜屏障指标[咬合蛋白(Occludin)、闭锁小带蛋白(ZO-1)、β-连环蛋白(β-catenin)、钙黏附蛋白(E-cadherin)]和组织病理学变化,进行病证结合的模型评价。结果 DSS溶液自由饮用叠加高脂饮食和气候箱5天后,多因素造模组与正常组和疾病模型组比较,一般情况较差,饮水量增加,腹泻评分升高、DAI评分升高、结肠长度缩短、结肠重量减轻、脾重增加,IL-6升高、IL-10下降、SC升高、CRP升高,β-catenin表达水平降低(均P<0.05)。HE染色可见结肠黏膜上皮破损,腺体排列紊乱甚至消失,杯状细胞明显减少,固有层中有大量炎性细胞浸润。双因素造模组存活率为85.71%,多因素造模组存活率为90.47%。结论 DSS溶液自由饮用叠加高脂饮食和气候箱可构建病证结合UC湿热证小鼠模型,DSS溶液自由饮用叠加高脂饮食和气候箱5天为构建该模型较理想的方法。

文章关键词:

论文分类号:R259;R-332